原代細胞分離與培養
原代細胞的分離與培養是細胞生物學的基礎工作。凡是來源于胚胎、組織、器官、外周血等經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞被稱為原代細胞。
原代細胞的分離
體液樣本原代細胞的分離
血液、羊水、腹水等液體材料的原代細胞分離比較簡單，采用低速離心（1000r/min）10分鐘，使不同細胞分層，根據需要獲取目的細胞。
組織樣本原代細胞的培養
組織樣本的細胞間結合緊密，為了將組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，主要有2種方法：機械分散法和消化分離法。
（一）機械分散法
該方法也叫物理裂解法，簡單快速，但是對細胞分散效果比價差，適用于纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
1. 酶消化分離法
這種方法常用的是胰蛋白酶和膠原酶。
胰蛋白酶是一種胰臟制品，對蛋白質有水解作用，主要作用于賴氨酸或精氨酸相連的肽鍵，使細胞間質中的蛋白質水解而使細胞分散開。
膠原酶是一種從細菌中提取出來的酶，對膠原有很強的消化作用，適用于消化纖維性組織、上皮組織以及腫瘤組織，對細胞間質有很好的消化作用。
消化分離法的總體流程：剪切、漂洗、消化、漂洗、機械分散。
2. 非酶消化法
也叫EDTA消化法，EDTA是一種非酶消化物，又稱螯合劑。常用不含鈣、鎂離子的PBS配成0.02%的工作液，對一些組織，尤其是上皮組織，的分散效果很好。該化學物質能與細胞上的鈣、鎂離子結合形成螯合物，利用結合后的機械力使細胞變圓，從而分散細胞或者使貼壁細胞從瓶壁上脫離。
原代細胞培養
原代細胞的培養也叫初代培養，是從供體取得組織細胞在體外進行首次培養，是建立細胞系的第一步，是基礎醫學科研中一項基本技術。原代細胞最接近和最能反映體內生長特性，適用于藥物敏感性實驗、細胞分化等實驗研究。
原代細胞由于種類眾多，分離方法各異，培養特性不一等因素，其分離和培養操作起來有一定難度，勵茨生物經過多年科研服務積累，在原代細胞分離與培養方面積累了大量經驗，目前已經在人、大鼠、小鼠等物種上成功分離培養原代細胞100余種。不僅能做原代細胞的分離和培養，還包括原代細胞純化、建系和永生化。
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